Slik kalibrerer du pipetter: 14 trinn (med bilder)

Innhold

Trinn
- Del 1 av 2: Kontroll av kalibreringen
- Del 2 av 2: Beregning av resultatene

En pipette er en type laboratorieutstyr som brukes til å måle og overføre svært små mengder væske. Nøyaktighet og presisjon i pipettemåling er nødvendig siden ethvert avvik i de dispenserte volumene kan påvirke resultatene av et eksperiment. For å sikre nøyaktighet er det nødvendig å kontrollere pipettekalibreringen med noen måneders mellomrom. Kalibreringsprosessen hjelper til med å verifisere at utstyret dispenserer riktige volumer slik at det kan rettes opp hvis det ikke er.

Trinn

Del 1 av 2: Kontroll av kalibreringen

Bilde med tittelen Do Pipette Calibration Step 1

1. Samle de nødvendige materialene. For å sjekke kalibreringen av en pipette trenger du en pipette, pipettespisser, destillert vann, et begerglass, termometer, en vekt og oppvask. Balansen må være spesifikk for mikrogram for å kalibrere mikropipetter med maksimalt 1 µl.

Du trenger ikke mer enn 5 ml vann. Fyll koppen med vann.
Sørg for at pipettespissene passer ordentlig.

Bilde med tittelen Do Pipette Calibration Step 2

2. Mål temperaturen på det destillerte vannet. Plasser termometeret i vannet og la det stå i minst ett minutt. Hvis den røde linjen på termometeret fortsatt beveger seg, la det stå i et minutt til. Etter et minutt registrerer du temperaturen i en notatbok. Fjern termometeret og tørk det når du er ferdig.

Temperaturen på vannet er viktig for beregningene som gjøres for å verifisere kalibreringen.

Bilde med tittelen Do Pipette Calibration Step 3

3. Plasser skalaen på vekten og sett den til null. Ideelt sett bruker du en balanse med dører og et isolert rom. Plasser bollen i rommet og lukk dørene. Hvis det ikke er noen dører, er det bare å sette bollen på vekten. Trykk på `Null` eller `Tare`-knappen og vent til balansen viser null.

Ved å nullstille balansen er vekten av plastbollen ikke inkludert og det blir mulig å måle kun vekten av det du putter i bollen.

Bilde med tittelen Do Pipette Calibration Step 4

4. Klargjør pipetten for kalibrering. Tørk av pipetten med etanol for å drepe eventuelle forurensninger før du starter - sørg også for at tuppen av pipetten ikke blir tilstoppet. Plasser riktig spiss på enden og still inn volumet du vil teste.

For kalibrering, test både det minste volumet og det største volumet pipetten kan levere.

Bilde med tittelen Do Pipette Calibration Step 5

5. Skyll spissen før kalibrering. Trykk knappen inn til første stopp og sett spissen inn i det destillerte vannet slik at ca. 2 mm av det er nedsenket i væsken. Slipp knappen for å suge opp litt væske, og dispenser deretter væsken igjen ved å trykke knappen ned. Gjenta tre ganger for å skylle spissen.

Trykk på knappen til andre stopp for å dispensere eventuell væske som er igjen i spissen, og fjern deretter pipetten fra vannet.

Bilde med tittelen Do Pipette Calibration Step 6

6. Aspirer kalibreringsvolumet. Med spissen ute av væsken, trykk knappen ned til første stopp. Plasser ca. 2 mm fra spissen i det destillerte vannet og slipp knappen for å trekke væsken inn i spissen. Vent omtrent et sekund før du fjerner spissen fra vannet.

Sørg for at spissen er helt nedsenket gjennom aspirasjonsprosessen. Du vil ikke ha bobler i spissen, ellers blir ikke resultatet riktig.

Bilde med tittelen Do Pipette Calibration Step 7

7. Doser væsken i vekten på vekten. Plasser spissen mot bunnen av bollen og trykk knappen ned til første stopp. Flytt til et annet sted, litt vekk fra vannet, og trykk på knappen til det andre stoppet. Hold nede knappen og løft tuppen av vekten.

Behold spissen på pipetten, fordi du vil bruke den igjen for å gjøre flere kalibreringstester. Pass på at spissen ikke berører noe.

Bilde med tittelen Do Pipette Calibration Step 8

8. Registrer vekten som indikerer balansen. Lukk døren ved bruk av balanse i et isolert rom. Vent til verdiene slutter å endre seg. Skriv denne verdien i notatboken.

Det er viktig å vente til tallet stabiliserer seg før du skriver det ned. Avlesningene dine blir feil hvis du ikke venter.

Bilde med tittelen Do Pipette Calibration Step 9

9. Gjenta denne prosessen til du har tatt minst 10 målinger. Nullstill balansen, skyll spissen, aspirer det samme volumet, dispenser volumet, og ta deretter vekten. Du trenger flere opptak med samme volum og deretter kan du snitte alle opptakene sammen.

Du kan gjenta den samme prosessen med forskjellige volumer, så lenge du tar flere målinger per volum.

Del 2 av 2: Beregning av resultatene

Bilde med tittelen Do Pipette Calibration Step 10

1. Bruk formelen for det beregnede volumet. Formelen for å beregne volumet dispensert av pipetten er V = w *Z, der w er vekten av vannet, Z er konverteringsfaktoren basert på tettheten til vannet, og V er det beregnede volumet av hvor mye vann som har blitt utlevert.

Du kan finne Z-variabelen ved å slå opp tettheten til vannet ved å bruke temperaturen registrert ved starten av eksperimentet.
For eksempel: Hvis temperaturen på vannet var 23°C, antar du en Z-verdi på 1,0035 µg/mg.

Bilde med tittelen Do Pipette Calibration Step 11

2. Beregn gjennomsnittet av de gjentatte forsøkene. Du må ha veid volumet av vann som dispenseres av pipetten minst 10 ganger. For å beregne gjennomsnittet av alle disse verdiene, legg dem sammen og del på 10. Hvis du har gjort flere eller færre prøver, legger du til hver prøve og deler summen på det totale antallet forsøk.

For eksempel: De ti vektene du registrerte for et pipettevolum på 10 µl er som følger: 9,89, 10,01, 10,02, 9,99, 9,95, 10,04, 9,96, 10,01, 9,99 og 9,98.

Gjennomsnittet er: (9,89 + 10,01 + 10,02 + 9,99 + 9,95 + 10,04 + 9,96 + 10,01 + 9,99 + 9,98) / 10 = 99, 84/10 = 9,984

Bilde med tittelen Do Pipette Calibration Step 12

3. Bruk variablene på ligningen og løs den. Når du har bestemt de riktige verdiene for hver variabel, kan du ta dem inn i ligningen og løse det beregnede volumet. For å løse dette, multipliser ganske enkelt gjennomsnittsvekten til alle testverdier med Z-verdien.

For eksempel: V = w *Z = 9,984 *1,0035 = 10,019

Bilde med tittelen Do Pipette Calibration Step 13

4. Beregn nøyaktigheten til pipetten. For å beregne nøyaktigheten kan du bruke ligningen A = 100 x V_gj.sn/V₀ bruk, der A er nøyaktigheten til pipetten, V_gj.sn gjennomsnittlig beregnet volum, og V₀ verdien du angir for pipetten. Nøyaktigheten bør være mellom 99-101 %.

Hvis pipetten er riktig kalibrert, bør den beregnede verdien være veldig nær den faktiske verdien du angir på pipetten.

For eksempel: A = 100 x V_gj.sn/V₀ = 100 x 10,019/10 = 100 x 1,0019 = 100,19 %

Denne pipetten er riktig kalibrert.

Bilde med tittelen Do Pipette Calibration Step 14

5. Send pipetten inn for kalibrering, om nødvendig. Hvis pipetten ikke består kalibreringstesten, slutt umiddelbart å bruke den til eksperimenter. Pipetter er svært delikate og dyre deler av laboratorieutstyr. Du kan ikke reparere kalibreringen selv, så du må sende den inn for riktig vedlikehold. Alternativt vil noen selskaper komme til laboratoriet ditt og kalibrere pipettene dine.

For service, kontakt selskapet som lager ditt spesifikke pipettemerke.